小(xiǎo)王子分享(xiǎng)有(yǒu)關(guān)熒光顯(xiǎn)微(wēi)鏡的其(qí)他信(xìn)息(xī)

更新(xīn)時間：2024-09-18

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小(xiǎo)王(wáng)子分享(xiǎng)有關(guān)熒光顯微鏡的其他信(xìn)息

熒(yíng)光(guāng)顯(xiǎn)微(wēi)鏡的(dí)分辨(biàn)率

熒(yíng)光(guāng)顯微(wēi)鏡(jìng)原(yuán)理

圖(tú) 1. 熒光顯(xiǎn)微鏡(jìng)的(dí)分辨(biàn)率

顯微鏡的分辨率被定義為“可以區(qū)分兩個鄰(lín)近(jìn)點(diǎn)和不(bù)同點的最小(xiǎo)距(jù)離(lí)。"顯微鏡使(shǐ)用(yòng)透(tòu)鏡來放(fàng)大和觀察物體(tǐ)，原(yuán)則上可(kě)以通(tōng)過組(zǔ)合(hé)透鏡(jìng)來(lái)無限增(zēng)加放大(dà)倍數(shù)。

然而，對於使用光(guāng)觀察樣品的光(guāng)學(xué)顯(xiǎn)微鏡(jìng)來(lái)說，由(yóu)於光的一(yī)種特性(xìng)——衍射，其分辨率極限(xiàn)約為(wéi)光波長(cháng)的(dí)一半。這(zhè)被(bèi)認為是(shì)顯微鏡(jìng)分辨(biàn)率的理(lǐ)論(lùn)極限，但(dàn)突(tū)破這一極限的(dí)技術(shù)被開(kāi)發出(chū)來，開發者於(yú) 2014 年(nián)榮獲諾貝爾化學獎。

這(zhè)種技術(shù)被稱為“超分(fēn)辨率(shuài)顯(xiǎn)微(wēi)鏡"。在超分辨率顯微鏡出現之(zhī)前(qián)，熒(yíng)光顯微(wēi)鏡的分(fēn)辨率極限約為250 nm，但采(cǎi)用(yòng)超分辨率顯微鏡(jìng)，可以獲得15至(zhì)100 nm的(dí)高(gāo)分辨率，接(jiē)近(jìn)電(diàn)子顯微鏡的分(fēn)辨(biàn)率。超分(fēn)辨率顯(xiǎn)微(wēi)鏡(jìng)使用多種(zhǒng)技術來(lái)避免分辨率限(xiàn)製因素並(bìng)實(shí)現高(gāo)分辨(biàn)率。

超分辨率顯(xiǎn)微(wēi)鏡大(dà)大(dà)提高了(liǎo)分(fēn)辨率並獲(huò)得了諾貝(bèi)爾化學獎，其中包(bāo)括(kuò)“PALM"和“STED"等方(fāng)法(fǎ)。 “PALM"和“STED"通過使(shǐ)用(yòng)特(tè)殊的(dí)光學係統(tǒng)和特殊(shū)的(dí)染料(liào)，已經(jīng)能(néng)夠突破(pò)熒光(guāng)顯微(wēi)鏡分辨率的限製(zhì)。使用(yòng)各種其(qí)他技術的超(chāo)分(fēn)辨(biàn)率顯(xiǎn)微(wēi)鏡(jìng)已(yǐ)經被創(chuàng)造出來，並且許(xǔ)多公司正在將其商業化。

2. 熒光(guāng)顯微(wēi)鏡的優點(diǎn)

可以用(yòng)熒(yíng)光(guāng)顯(xiǎn)微(wēi)鏡確認的尺寸(cùn)

圖2. 可(kě)以用(yòng)熒光顯微鏡(jìng)觀(guān)察的物體

熒光(guāng)顯微鏡的(dí)優點(diǎn)是(shì)它可以(yǐ)以視(shì)覺(jué)信(xìn)息(xī)的形式詳(xiáng)細觀察分(fēn)子行為和細胞(bāo)結(jié)構。根據目(mù)的(dí)使(shǐ)用(yòng)適當(dāng)的熒光(guāng)顯微(wēi)鏡(jìng)，可(kě)以以(yǐ)高時間(jiān)和(hé)空(kōng)間分(fēn)辨率觀(guān)察目標。

還(huán)可以(yǐ)使用多(duō)種染料觀(guān)察物(wù)體。例如，當(dāng)兩(liǎng)種不同的蛋白質用(yòng)紅(hóng)色(sè)和綠色熒光(guāng)物質(zhì)標記並觀察(chá)時(shí)，如(rú)果某些(xiē)區(qū)域(yù)顯示(shì)黃(huáng)色，則(zé)表明這兩種蛋(dàn)白質可(kě)能(néng)存(cún)在(zài)於(yú)細胞(bāo)內(nèi)的同(tóng)一位(wèi)置。

根據目的(dí)和應用開(kāi)發(fā)了(liǎo)各種(zhǒng)熒光材料(liào)和(hé)熒光(guāng)顯(xiǎn)微鏡，其在(zài)生命(mìng)科(kē)學研究和臨(lín)床研究中的重(zhòng)要性日益增加(jiā)。

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